NY_T 3001-2016 饲料中氨基酸的测定 毛细管电泳法
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9 |
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日期： |
2024-8-14 |
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ICS 65.120,B46 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3001—2016,饲料中氨基酸的测定,毛细管电泳法,Determination of amino acids in feed-,Capillary electrophoresis,2016-11-01 发布2017-04-01 实施,在 中华人民共和国农业部发布,NY/T 3001—2016,刖 百,本标准按照GB/T 1. 1—2009给岀的规则起草,本标准由农业部畜牧业司提出,本标准由全国饲料エ业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口,本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所［国家饲料质量监督检验中心,(北京)］,本标准主要起草人:李丽禧、冯忠华、王彤、饶正华、崔昂、魏书林、张苏、严明、严寒、唐健、田静、,刘晓露,I,NY/T 3001—2016,饲料中氨基酸的测定毛细管电泳法,1范围,本标准规定了饲料中氨基酸测定的毛细管电泳法,本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和饲料原料中氨基酸含量的测定。可测定的,氨基酸种类包括胱氨酸、赖氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、脯氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、,丙氨酸、缄氨酸、亮氨酸与异亮氨酸之和、酪氨酸和苯丙氨酸的测定,不适用于蛋氨酸和色氨酸含量的,测定,2规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法,GB/T 14699. 1饲料采样,GB/T 15399—1994饲料中含硫氨基酸测定方法一离子交换色谱法,GB/T 18246—2000饲料中氨基酸的测定,GB/T 20195动物饲料试样的制备,3原理,样品需在6 moi/L盐酸中水解成单ー氨基酸,经异硫富酸苯酯溶液(PITC)衍生,再用毛细管电泳,的方法进行分离和定量。但待测氨基酸不同,前处理方法有所不同。其中.胱氨酸必须在水解前用过甲,酸氧化为磺基丙氨酸,才能衍生测定;而酪氨酸必须用未氧化的样品水解测定;其他氨基酸则可选用上,述任一方法处理测定,4试剂和材料,除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯和符合GB/T 6682规定的ー级水,4. 1 碳酸钠溶液,c(Na2co3)= 0.1 mol/L:取(0. 715±0. 001) g 碳酸钠,加 15 mL水于 25 mL 的容量,瓶中溶解,用水定容。溶液在塑料瓶中保存2个月,4. 2异硫盆酸苯酯溶液(PITC溶液):取0. 4 mL PITC于25 mL棕色容量瓶中,用2 ー丙醇定容至刻度,并且充分混合均匀。溶液在2℃.8℃的冰箱中保存2个月。取用PITC溶液尽量在通风柜中进行,4.3氢氧化钠溶液:称取2 g氢氧化钠于250 mL玻璃杯中,用水稀释至100 mL。在塑料瓶中保存6,个月,4.4盐酸,c(HCl) = l. 0 mol/L:吸取8. 3 mL浓盐酸,置于容量瓶中,用水稀释并定容至100 mL,4.5磷酸氢二钠溶液:取(4. 78±0. 01) g十二水磷酸氢二钠于100 mL容量瓶中,溶解后定容。溶液,保存2个月,4. 6磷酸二氢钠溶液:取(2. 28+0. 01) g 一水合磷酸二氢钠或(2. 57+0. 01) g二水合磷酸二氢钠于,100 mL容量瓶中,溶解后定容至刻度。溶液保存2个月,4.7磷酸盐缓冲液(pH 7. 7.7. 8):取50 mL磷酸氢二钠溶液(4. 5)和5 mL磷酸二氢钠溶液(4. 6)于,100 mL容量瓶中,用水定容。溶液保存2个月,1,NY/T 3001—2016,4. 8 Bー环糊精溶液:取(〇. 570+0. 001) g (3ー环糊精倒入50 mL烧杯中,加入25 mL.30 mL水并充分,混合至完全溶解。若有必要,可将烧杯放在水浴锅中加热(温度不超过50℃)。溶解后转移至50 mL的,容量瓶中,用水定容并充分混合。溶液保存2个月,4. 9背景电解液:取10mL卜ー环糊精溶液(4. 11)和!0 mし磷酸缓冲液(4. 10)于25 mL容量瓶中,用水,定容至刻度。溶液保存2周,4. 10 13种单ー氨基酸储备溶液,4.011^/1111,:称取精氨酸盐酸盐(0.024 20±0.000 01)8，一水合组氨,酸盐酸盐(〇. 027 〇〇+〇. 000 01)g,赖氨酸盐酸盐(0. 024 90±0. 000 01)g,丙氨酸、天冬氨酸、缴氨酸、甘,氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、纟赧即OO±O. 000 ODg,分别置于!0 mし带,m,60℃~70℃来充分地溶解氨基,f/L,内,1(J,取,0. 00 、〇,H,以,、丝,个月,001),盖瓶中,分别准确加入5 mL水溶縮有必要,可在水浴锅中缓慢カ,酸。天冬氨酸和谷氨酸储备液爲複处!景其他,4. 1I苯丙氨酸和酪氨酸储备溶液?,盐酸(4. 4)和9 mL水白,液保存2个月,4. 12磺基丙氨酸储备ッWPO40 00±00(W,勺两种氨基酸,用1mL,其完全溶解。储备,小玻璃瓶中,加水溶,解并定容至10,4. 13 13种氨,氨酸、赖氨酸、月,盖小瓶中,加,4. 14 3种氨,各液:分别取,、苏氨酸,［巒?丒充分混合,和200 ML苯丙氨酸和酪,(4. 12),加入 1 850,5仪器和设,5. I毛细管电,nm,5.2,5.3,5.4,5.5,5.6,5.7,_______ 液(4.10),:充分混合 毎种氨基酸的別量浓度均为0.……
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